新冠疫情的爆发，使得全球卷入了这场没有硝烟的战斗中，相较2021年，疫情虽正在往好的方向发展，但全球确诊人数依然超过5.4亿1,2。
等温扩增
核酸检测是确诊 SARS-CoV-2 感染的最主要依据。目前可用于 RNA 病毒的核酸检测技术主要有基因测序、聚合酶链式反应（PCR）、等温核酸扩增等。其中荧光定量PCR检测方法是首选方案3。
然而反转录实时荧光定量 PCR（RT-qPCR）的检测方法需要依赖温控精度良好的热循环仪，并且PCR反应中必须的变性、退火和延伸步骤，使整个扩增检测时间较长，难以实现对SARS-CoV-2的现场快速检测4。
核酸等温扩增技术无需热循环仪，扩增反应效率高、速度快，非常适合于病原体核酸的现场快速检测。因此不少相关从业人员，都曾把核酸快速检测的希望，寄托于等温扩增技术上面。
不同等温扩增技术优劣
不少核酸等温扩增方法已相继被用于SARS-CoV-2的检测。包括依赖核酸序列的扩增技术（NASBA）、重组酶聚合酶扩增技术（RPA）、环介导等温扩增技术（LAMP）、交叉引发扩增技术（CPA）、切刻内切酶核酸扩增反应（NEAR）等。
这些技术原理各异，产物检测方法各不相同，造成它们在检测SARS-CoV-2时的灵敏度、特异性、靶标基因、所需仪器、检测时间等方面存在差异。
市面上这几种等温扩增的方法各有优缺点，以下来分析：
SAT是在 NASBA 技术的基础上，进一步提高了检测的灵敏度和特异性，但是并未能从根本上克服NASBA 技术反应时间长的问题。
荧光RT-RAA法：荧光RAA方法灵敏度较高。但是对样品核酸品质要求较高，需要搭配传统的提取方法。并且样品同一时间只能检测单一靶标基因。
CPA实时荧光法：CPA扩增产物采用分子信标进行检测，然而这个方法的通量太小。此外交叉引物的设计要求较高，在研发过程中，引物的筛选和测试，十分繁琐。这可能会造成基于该技术的检测试剂平台开发周期较长4 。
LAMP芯片法：可利用肉眼观察颜色变化，或灰度检测来判读检测结果，虽然降低了对仪器设备的要求，适合在资源有限和经济不发达地区开展核酸检测，然而主观判断颜色变化存在较大个体差异5，有可能影响结果判读。
除了上述提到的情况外，等温扩增还有以下一些问题
1、样品前处理（核酸提取）是等温扩增一个主要制约因素。
2、如何实现单管闭管条件下的多重或多靶标等温扩增检测，并同时具有高灵敏度和特异性，也是亟待解决的技术难题。
3、在理论上等温扩增技术不能够通过反应时间来指示核酸扩增量，这难以实现精准的定量检测，更加适合于半定量或定性检测。
4、某些等温扩增方法，如 LAMP 等温扩增涉及多个引物，往往需要通过优化引物设计来确保核酸检测的特异性与灵敏度，这提高了其技术实现难度8。
现阶段而言，某些等温扩增技术具有一定现场应用的前景，然而目前的产品通量偏低，时间偏长和灵敏度偏低，还是限制了这项技术的应用场景7。这些缺点限制了等温扩增的发展，也造成了等温扩增技术空有好的设想却迟迟无法落地的困境。
那有没有既兼具了等温扩增快速、仪器简单的特点，而又有传统荧光定量PCR特异性好、准确度高的检测方法？答案是有的。快速荧光定量PCR就是这个问题的终极解决方法。它既有传统荧光定量PCR准确度高，灵敏度好的特点，而又通过技术革新，具备比等温扩增更快速完成实验的能力。
革新
传统的荧光定量PCR实验时间长，是由于受到仪器升降温速度，以及传热的效率所限，整个实验时间时长一般为70-120分钟。
一般来说，荧光定量PCR反应的温度条件是较为固定的，既然无法改变温度条件，若想提高整个实验的速度，那么只能从两方面着手进行优化：一是提升温控性能，二是提高热传递效率。百泰克公司历时三年研发的PCR仪，就是从这两方面入手，打破传统荧光PCR反应时间的枷锁，为整个荧光定量PCR技术带来革新。
百泰克快速荧光定量PCR仪BTK-8，采用先进的升降温模块，升降温可达12℃/s，平均升降温速度为10℃/s，为传统荧光PCR仪的3-5倍。由于变温PCR反应时，温度需要从58℃提升至95℃，再降至58℃，如此循环40~45次，因此升降温速率的提升可将原本70-120min的检测提速至20~30min完成。
耗材方面，BTK-8摒弃了传统的0.1ml、0.2ml PCR反应管，采用新型的注塑工艺与柔性膜结合技术，研发芯片式反应耗材，适合大规模机械化生产，成本进一步降低。
单个芯片包含有10个独立的样品孔，芯片加样孔较小，不容易与空气进行交换，从而大大降低了孔洞间的气溶胶交叉污染的可能性，检测体系具有超高的检测准确性，可达到ABI Q6同等灵敏度，且芯片加样无需离心去掉气泡，操作起来更加便捷。
从下表可以看出，现在BTK-8这款快速定量PCR仪，已经能把实验时间压缩至30分钟以下，而且检测下限能够达到200 copies/ml，能满足现在的检测需求。相比于等温扩增技术，快速荧光PCR的时间更短、准确性更高。
结语
在过去的时间内，等温扩增技术凭借其简单快速、便于在基层单位推广的特点，在部分人畜共患病、妇科恶性肿瘤、以及多种呼吸道疾病的检测中发挥着一定的作用。然而伴随着BTK-8快速荧光PCR仪的横空出世，使得相关的检测有了一个更好的选择。能提供更快捷、准确实验结果的快速荧光定量PCR仪，将会完美替代等温扩增的检测手段，在多个领域中发挥巨大作用。
特别是在新型冠状病毒疫情仍然全球流行的时期，由于各国防控情况不平衡，新型冠状病毒或将在相当长的一段时间内与人类共存，甚至有可能会成为一种长期存在的一种呼吸道传播病原体。而在口岸快速排查，基层发热门诊快速分流的实际需求，均要求能够提供快速、准确、有效的实验检测结果。相比于等温扩增技术、BTK-8快速荧光PCR仪则更能满足这些场景的需求。
